ブラントエンドでクローニング可能なキット

PCR産物のクローニングにはTAクローニングをしていたのだけれど、High Fidelity PCR酵素を使うとPCR産物は平滑末端になっているので、Tベクターに入れるには一手間かかるのが面倒です。

平滑末端でもクローニング可能なベクターを使うとクローニング作業の手間が減らすことができます。これまでに試したキットは以下の２つ。

1 Zero Bluntクローニングキット
　　pCR-blunt ベクター (カナマイシン)

2 CloneJET PCR Cloning Kit
　　pJET1.2/blunt ベクター(アンピシリン)

どちらもセレクションに致死遺伝子を用いているため、セルフライゲーションしたプラスミドが入った大腸菌は増殖しない。pJET1.2の方がアンピシリンで選抜できるので、形質転換にかかる時間は短い。ECOSと組み合わせることでかなりクローニング作業に使う時間が短くなった。

なお、どちらもサーモフィッシャーから購入可能。